赭曲霉毒素A免疫亲和柱

产品名称：赭曲霉毒素A免疫亲和柱
产品品牌：HPSW
产品货号：06993-2530
产品规格：3ml

【概要】
赭曲霉毒素A （Ochratoxin A）是曲霉属和青霉属的真菌形成的次级代谢产物，属烈性的肾脏毒和肝脏毒，广泛存在于各种食物中，谷物及其副产品是赭曲霉毒素A的主要来源。动物实验表明摄入了被这种毒素污染的饲料后，会发生急性或慢性中毒症。防止污染赭曲霉毒素A的食品和饲料直接或间接地进入人类食物链，加强对赭曲霉毒素A的检测十分重要。
 
【适用范围及性能】
本公司真菌毒素免疫柱系列产品测试形式是一个高性能的免疫亲和柱，设计用于在进行 HPLC（高效液相色谱法）、GC-MS（气相色谱-质谱联 用 仪）、ELISA（酶联免疫吸附剂测定）之前清理（净化）或 浓缩样本。
用于定性、定量检测谷物、酒类等食品和饲料等样本中的赭曲霉毒素A时的样品前处理。
柱容量：≥400ng
回收率：≥90%
 
【试验原理】
本产品的测定的基础是抗原抗体反应，赭曲霉毒素A单克隆抗体连接在柱内凝胶上，样品中的赭曲霉毒素A经过提取、过滤、稀释，然后将样品提取液缓慢的通过赭曲霉毒素A免疫亲和层析柱，在免疫亲和柱内，赭曲霉毒素A与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他物质。用甲醇洗脱赭曲霉毒素A，然后注入到分析仪器中用于检测。
 
【包装组成】
25支/盒，3mL柱管/支
产品说明书1份
 
【需要而未提供的设备及试剂】
设备：
┅┅高速均质器或组织匀浆机
┅┅粉碎机
┅┅200ml/50ml量筒
┅┅天平：感量0.1g
┅┅微量移液器：单道 100ml～1000ml
┅┅槽纹滤纸（折叠快速定性或定量滤纸）
┅┅玻璃微纤维滤纸（1.5mm孔径）
┅┅50ml漏斗
┅┅一次性玻璃试管
┅┅泵流操作架（包括空气泵，不同容积的玻璃注射器等）
试剂：
┅┅甲醇（色谱级）
┅┅蒸馏水或去离子水
┅┅pH7.0磷酸盐缓冲溶液（PBS缓冲液）：称取8.0g氯化钠，1.2g磷酸氢二钠，0.2g磷酸二氢钾，0.2g氯化钾，用990mL纯水溶解，然后用浓盐酸调节pH值至7.0，最后用纯水稀释至1000mL
┅┅清洗缓冲液：25g 氯化钠+5g碳酸氢钠+0.1mL吐温-20
   用纯水稀释至1000 mL
 
【试剂配制】
样品提取液：配制甲醇-水（8：2）溶液作为样品提取液
 
【样本处理步骤】
（一）花生，玉米，大米，小麦及其制品和饲料
┅┅称取20g粉碎的样品于100mL容量瓶中，加入5.0g氯化钠，以甲醇-水（8：2）溶液定容；
┅┅转移到均质杯中，以均质器高速搅拌，提取2分钟；
┅┅4000r/min离心5min或用定量滤纸过滤；
┅┅取10mL滤液并加入40mLPBS缓冲液稀释，用玻璃微纤维滤纸过滤，取过滤后液体待测；
┅┅将免疫亲和柱连接于10.0mL玻璃注射器下。准确移取10.0mL样品提取液注入玻璃注射器；
┅┅将空气压力泵与玻璃注射器连接，调节压力使溶液以约1滴/S流速缓慢通过免疫亲和柱，直至2~3mL空气通过柱体；
┅┅以10.0mL清洗缓冲液淋洗柱子1次，流速为1滴-2滴/S，弃去全部流出液，
┅┅再以10.0mL水淋洗柱子1次，流速为1滴-2滴/S，弃去全部流出液，并使2mL~3mL空气通过柱体；
┅┅准确加入1.0mL色谱级甲醇洗脱，流速为1 滴/S，收集全部洗脱液于玻璃试管中，供检测用。
 
（二）啤酒，黄酒等酒类
┅┅取10mL试样脱气后与90mLPBS缓冲液混匀，用玻璃微纤维滤纸过滤，取过滤后液体待测；
┅┅将免疫亲和柱连接于10.0mL玻璃注射器下。准确移取10.0mL样品提取液注入玻璃注射器；
┅┅将空气压力泵与玻璃注射器连接，调节压力使溶液以约1滴/S流速缓慢通过免疫亲和柱，直至2~3mL空气通过柱体；
┅┅以10.0mL清洗缓冲液淋洗柱子1次，流速为1滴-2滴/S，弃去全部流出液，
┅┅再以10.0mL水淋洗柱子1次，流速为1滴-2滴/S，弃去全部流出液，并使2mL~3mL空气通过柱体；
┅┅准确加入1.0mL色谱级甲醇洗脱，流速为1 滴/S，收集全
   部洗脱液于玻璃试管中，供检测用。
 
【结果判定】
经免疫亲和柱净化后，收集到的甲醇洗脱液可直接使用荧光计或者HPLC检测，也可使用薄层色谱或者酶联免疫试剂盒进行检测。收集到的1ml洗脱液中的赭曲霉毒素A含量相当于1g样品中赭曲霉毒素A含量。
 
【注意事项】
┅┅赭曲霉毒素危害极大，应戴手套操作。
┅┅不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
 
【贮藏条件及保存期】
贮藏条件：亲和柱2-8℃保存，不可冻存
保存期：该产品有效期为12个月。