T-2毒素免疫亲和柱

产品名称：T-2毒素免疫亲和柱
产品品牌：HPSW
产品货号：06996-2530
产品规格：3ml

【概要】
T-2毒素是单端孢霉素类中的主要毒素之一，是三线镰刀菌、拟技孢镰刀菌、梨孢镰刀菌等产生的有毒代谢产物，属镰刀菌毒素类。本病发生的主要原因是动物采食了受T-2毒素污染的玉米、麦类等饲料。在生产中，T-2毒素中毒以猪最为多见，其次是家禽，反刍动物发生较少。
【适用范围及性能】
用于定性、定量检测谷物、酒类等食品和饲料等样本中的玉米赤霉烯酮时的样品前处理。
柱容量：≥1500ng
回收率：≥90%
 
【试验原理】
本产品的测定的基础是抗原抗体反应，T-2 toxin单克隆抗体连接在柱内凝胶上，样品中的T-2 toxin经过提取、过滤、稀释，然后将样品提取液缓慢的通过T-2 toxin免疫亲和层析柱，在免疫亲和柱内，T-2 toxin与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他物质。用甲醇洗脱玉米赤T-2 toxin，然后注入到分析仪器中用于检测。
 
【包装组成】
25支/盒，3mL柱管/支
产品说明书1份
 
【需要而未提供的设备及试剂】
设备：
┅┅高速均质器或组织匀浆机
┅┅粉碎机
┅┅200ml/50ml量筒
┅┅天平：感量0.1g
┅┅微量移液器：单道 100ml～1000ml
┅┅槽纹滤纸（折叠快速定性或定量滤纸）
┅┅玻璃微纤维滤纸（1.5mm孔径）
┅┅50ml漏斗
┅┅一次性玻璃试管
┅┅泵流操作架（包括空气泵，不同容积的玻璃注射器等）
试剂：
┅┅甲醇(CH3OH):色谱纯。
┅┅乙腈(CH3CN):色谱纯。
┅┅ 甲苯(C6H5CH3):色谱纯。
┅┅-二甲基氨基吡啶。
┅┅-蒽腈(1-anthroylnitrile,1-AN)。
┅┅蒸馏水或去离子水
┅┅pH7.0磷酸盐缓冲溶液（PBS缓冲液）：称取8.0g氯化钠，1.2g磷酸氢二钠，0.2g磷酸二氢钾，0.2g氯化钾，用990mL纯水溶解，然后用浓盐酸调节pH值至7.0，最后用纯水稀释至1000mL
 
【试剂配制】
样品提取液：配制甲醇-水（8：2）溶液作为样品提取液
4-二甲基氨基吡啶溶液:准确称取0.0325g,4-二甲基氨基吡啶于100mL容量瓶中,用甲苯定容
至刻度
-蒽腈溶液:准确称取0.030g1-蒽腈于100mL容量瓶中,
甲苯定容至刻度
【样本处理步骤】
提取
粮食及粮食制品
将样品研磨,硬质的粮食等用高速粉碎机磨细并通过试验筛。称取25.0g(精确到0.1g)过筛样品于容量瓶中,用提取液定容至100mL,转移至均质杯中,以均质器高速搅拌提取2min,定量滤纸过滤。
移取10.0mL滤液加入40mL水稀释混匀,经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清,滤液备用。
酱油、醋、酱及酱制品
称取25.0g(精确到0.1g)混匀的试样,用甲醇定容至50.0mL,超声提取10min,定量滤纸过滤。
移取10.0mL滤液加入40mL水稀释混匀,经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清,滤液备用。
酒类
取脱气酒类试样(含二氧化碳的酒类使用前先置于4℃冰箱冷藏30min,过滤或超声脱气)或其他不含二氧化碳的酒类试样20.0g(精确到0.1g)于50mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,定量滤纸过滤。移取10.0mL滤液加入40mL水稀释,经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清,滤液备用。
净化和洗脱
将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下,准确移取10.0mL 上述的提取滤液,注入玻璃注射器中。 将空气压力泵与玻璃注射器连接,调节压力使溶液以约1 滴/s的流速缓慢通过免疫亲和柱,直至空气进入亲和柱中。用10mL水淋洗亲和柱,流速为1滴/s-2滴/s,直至空气进入亲和柱中,弃去全部流出液,抽干小柱。准确加入1.0mL甲醇洗脱,流速约为1滴/s,收集洗脱液。
衍生
标准工作液的衍生:取不同浓度的标准工作液各1mL,在50℃ 下用氮气吹干,加入50μL，4-二甲基氨基吡啶溶液和50μL，1-蒽腈溶液,在涡旋混合器上混匀1min,50℃反应15min,在冰水中冷却10min后取出,50℃下氮气吹干,用1.0mL流动相溶解,待HPLC测定。
样品的衍生:将5.2中洗脱液在50℃下用氮气吹干,按上述步骤进行
【注意事项】
┅┅T-2 toxin危害很大，应戴手套操作。
┅┅不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
 
【贮藏条件及保存期】
贮藏条件：亲和柱可于常温保存，2-8℃储存可延长有效期，不可冻存
保存期：该产品有效期为12个月。